中国卒中杂志 ›› 2017, Vol. 12 ›› Issue (07): 604-608.DOI: 10.3969/j.issn.1673-5765.2017.07.008
师忠芳,徐立新,闫旭,董丽萍,袁芳
摘要:
目的 通过检测腺苷酸活化蛋白激酶( a denosine m onophosphate-activated protein kinase,AMPK)α1、 α2、β1、β2、γ1及γ2亚基在培养大鼠星形胶质细胞中的表达,探讨AMPK在星形胶质细胞中以何种 形式组成三聚体。 方法 取新生1 d的Wistar大鼠脑皮层进行星形胶质细胞培养,用胶质原纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)和S100β免疫荧光染色鉴定星形胶质细胞。应用反转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)法检测培养星形胶质细胞中AMPK各亚基的表达情况。 结果 GFAP和S100β细胞免疫荧光染色显示,培养细胞95%以上为免疫荧光染色阳性细胞。RT-PCR 实验结果显示培养的星形胶质细胞中有AMPK α1、α2、β1、γ1及γ2亚基的特异性目的条带出现,没 有AMPK β2亚基目的条带出现;在出现的5种特异性目的条带中,AMPK α2、β1及γ1亚基目的条带 表达相对较多,而AMPK α1及γ2亚基只有微弱表达。 结论 星形胶质细胞中AMPK由α2、β1及γ1亚基组成三聚体,在星形胶质细胞能量代谢调节中发挥 重要作用。